HD-PTP, una tirosin fosfatasi implicata nel controllo della motilita’ endoteliale

Il processo di fosforilazione di proteine è un meccanismo essenziale nel controllo della trasduzione del segnale in cellule eucariote. La fosforilazione delle tirosine regola importanti processi, quali trascrizione genica, processamento dell’mRNA, proliferazione e differenziamento. I residui di tirosina sono soggetti a fosforilazioni reversibili regolate da due diversi tipi di proteine con funzione opposta: proteine tirosin-chinasi e proteine tirosin-fosfatasi (PTP). Queste ultime sono implicate nel modulare la risposta cellulare ai fattori di crescita, nella regolazione del ciclo cellulare, nella tumorigenesi. HD-PTP è una protein tirosina fosfatasi citosolica identificata come potenziale oncosoppressore coinvolto nella via di trasduzione del segnale che include Ras. Nel presente studio abbiamo dimostrato che HD-PTP è coinvolto nella regolazione della motilita' in cellule endoteliali. La capacita' migratoria delle cellule è estremamente rilevante in processi come angiogenesi (normale e tumorale) o invasività tumorale. Cellule endoteliali ECV304 sono state transfettate stabilmente con un vettore esprimente un cDNA antisenso per HD-PTP. Abbiamo quindi isolato i cloni sopravvissuti alla selezione e scelto quelli che presentavano un’importante riduzione dell’espressione di HD-PTP. I cloni con una massiccia riduzione di HD-PTP mostravano un tipico fenotipo migratorio che veniva revertito dal trattamento con PP2, un inibitore farmacologico di Src. I cloni privi di HD-PTP e i rispettivi controlli sono stati oggetto di esperimenti di wound assay che ha evidenziato come le cellule senza HD-PTP esibiscano un’incrementata motilità che viene inibita dopo trattamento con PP2. Recentemente, abbiamo identificato HD-PTP come una proteina in grado di interagire con la protein chinasi Src. c-src è un protooncogene coinvolto in molteplici funzioni tra cui la migrazione cellulare. Abbiamo quindi ipotizzato che HD-PTP possa agire come inibitore della motilità cellulare attraverso Src. Dato che la cascata di trasduzione del segnale di Src e Ras sono collegate, questi dati suggeriscono che HD-PTP può essere coinvolta nella regolazione della motilità cellulare attraverso Src\Ras, due tra i più importanti mediatori cellulari della tumorigenesi. Molte tirosine fosfatasi sono coinvolte nelle cascate di trasduzione del segnale che modulano l'espressione di geni implicati nella migrazione cellulare, funzione cruciale in processi fisiologici e patologici. In futuro, ci proponiamo di studiare l'interazione Src\HD-PTP cercando di comprendere se Src è un substrato di HD-PTP o viceversa. Inoltre, cercheremo di identificare i geni la cui espressione viene regolata da HD-PTP utilizzando tecniche di iRNA e microarray.