Effetto delle VLDL sull'espressione di mRNA per il PAI-1 in cellule HepG2

Studi precedenti dimostrano come le lipoproteine a densità molto bassa (VLDL) siano in grado di influenzare la sintesi di PAI-1 da parte di cellule HepG2. Questo studio si propone di definire i meccanismi molecolari coinvolti nell'effetto delle VLDL sulla sintesi di PAl-1. Il gene per il PAI-1 codifica per due mRNA, uno più instabile di 3.2 kb e uno più stabile di 2.2 kb come conseguenza di una poliadenilazione alternativa. Le VLDL (10-100 µg di proteina/ml) incubate per 16 ore con cellule HepG2 inducevano un aumento concentrazione-dipendente della espressione del trascritto per il PAI-1 di 2.2 kb senza influenzare l'espressione del trascritto di 3.2 kb, cambiando pertanto il rapporto tra i due mRNA in favore della forma più stabile. La cicloesimide (25 µg/ml) incubata con le cellule in presenza di VLDL induceva la sovraespressione di entrambi i trascritti per il PAI-1 suggerendo pertanto che l'effetto delle VLDL richiedeva la "de novo" sintesi proteica. Esperimenti di nuclear run-on hanno permesso di escludere un effetto delle VLDL a livello della trascrizione del gene per il PAI-1. D’altro canto, in presenza di VLDL, l'emivita di entrambi i trascritti per il PAI-1 era prolungata. L'insieme di questi dati, suggerisce come le VLDL inducano un aumento della sintesi di PAI-1 conseguente ad un effetto di stabilizzazione del mRNA per la proteina stessa. L'effetto differenziale nei confronti dell'accumulo dei due trascritti per il PAI-1 suggerisce come le VLDL possano indurre una scelta preferenziale di uno dei due siti di poliadenilazione, inducendo pertanto l'accumulo del trascritto più stabile.