Microelettroforesi e caratteristiche elettrofisiologiche di membrana di cellule tumorali (II)

Microelettroforesi e caratteristiche elettrofisiologiche di membrana di cellule tumorali. Colesterolo e fosfolipidi hanno un ruolo fondamentale nella modulazione della fluidità della membrana plasmatica cellulare. La membrana plasmatica di molte cellule tumorali possiede una fluidità maggiore di quella della rispettive cellule normali. L'effetto del colesterolo sulla crescita e morfologia cellulare è stato da noi recentemente studiato. Scopo di questa ricerca è stato lo studio delle proprietà elettrofisiologiche di cellule tumorali. Le cellule HT-29 (linea cellulare stabile di adenocarcinoma umano di colon) sono state coltivate in RPMI 1640, in assenza ed in presenza di colesterolo alle concentrazioni di 25, 50, 100 microg/mL. In queste condizioni è stata misurata la differenza di potenziale elettrico di membrana mediante microelettrodi e studiato l'effetto di particolari sostanze inibenti trasporti di membrana. Il potenziale elettrico della membrana cellulare è più elevato in presenza che in assenza di colesterolo; ciò è forse dovuto al fatto che il colesterolo rende più rigida la membrana plasmatica e quindi la sua resistenza elettrica (-20 ± 1 mV contro -24 ± 2 mV). Inoltre provocando una iper- oppure una depolarizzazione della membrana, variando la concentrazione esterna di K+, si è visto che l'iperpolarizzazione è più elevata in presenza di colesterolo mentre la depolarizzazione è minore; ciò è probabilmente dovuto all'aumentata resistenza elettrica dovuta al colesterolo. L'amiloride, che blocca lo scambio Na+/H+ nelle cellule normali provoca un'iperpolarizzazione anche nelle HT-29 ma dopo un tempo più lungo. La ouabaina, che inibisce l'attività dell'ATPasi-Na+, K+ dipendente, depolarizza la cellula più lentamente quando è presente il colesterolo. Questa prima serie di risultati elettrofisiologici, unitamente ai dati sulle curve di crescita e sulla morfologia della membrana cellulare, conferma che la membrana plasmatica riveste un ruolo molto importante per il mantenimento dell'omeostasi cellulare e per un normale processo di differenziazione.