Development of bioprocesses for the production of food protein hydrolysates containing bioactive peptides

The first two activities of the PhD thesis project are described. Firstly, we performed the selection of lactic acid bacteria by screening bacterial cell envelope-associated proteinases (CEPs) at the genetic level as well as by testing the proteolytic activity on milk caseins. Moreover, fractionation of casein hydrolysates (CHs) by means of high-performance liquid chromatography (HPLC) was performed. Secondly, we developed a protocol for the in vitro biological analysis of CHs, addressed to determine their immunomodulatory activity by using a luciferase reporter gene system. This system is based on a nuclear factor kappa B (NF-κB)-inducible reporter plasmid, pNiFty2-Luc, in human colonic adenocarcinoma cells Caco-2.

Sviluppo di bioprocessi per l’ottenimento di idrolizzati di proteine alimentari contenenti peptidi ad attività biologica. Sono descritte le prime due attività previste nel progetto di tesi di dottorato. Inizialmente, è stata effettuata la selezione di alcuni ceppi di batteri lattici valutando la presenza e il tipo di proteinasi di parete delle cellule batteriche (CEPs) e testando l'attività proteolitica dei ceppi proteasi-positivi sulle caseine del latte. Il profilo peptidico degli idrolizzati di caseina (CHs) è stato studiato mediante cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC). In seguito, l’attività immunomodulante degli stessi CHs è stata valutata in vitro usando un sistema reporter basato sull’attività dell’enzima luciferasi. Questo sistema è costituito dal plasmide pNiFty2-Luc, inducibile dal fattore nucleare kappa B (NF-κB), introdotto in cellule umane di adenocarcinoma del colon Caco-2.