L’inibizione dell’attività ATPasica della dineina riduce l’aggregazione del recettore degli androgeni mutato responsabile dell’ Atrofia Muscolare Spinale e Bulbare (SBMA)

Tra le Malattie del Motoneurone, l’Atrofia Muscolare Spinale e Bulbare (SBMA) ha assunto un particolare interesse. Tale malattia è legata al cromosoma X ed è dovuta all’espansione della sequenza CAG presente nel primo esone del gene che codifica per il recettore androgenico (AR). Tale espansione nucleotidica codifica per una sequenza poliQ che porta l’AR-poliQ ad assumere conformazioni aberranti (misfolding). L’interesse per questa malattia risiede nel fatto che la tossicità dell’AR-poliQ è strettamente dipendente dal suo ligando testosterone. Questo steroide induce il misfolding dell’AR che così tende a formare aggregati, capaci di sregolare il sistema di controllo di qualità proteico e saturare i sistemi ubiquitina proteasoma e/o autofagico. L’autofagia richiede il trasporto, mediato dalla dineina, delle proteine misfoldate verso il centro di organizzazione dei microtubuli, ove, si ha la formazione dell’autofagosoma. Successivamente la dineina partecipa al trasporto dell’autofagosoma mediandone la fusione con il lisosoma. In immunofluorescenza abbiamo dimostrato che la dineina è sequestrata all’interno degli aggregati di AR misfoldato (GFP-ARQ.48) indotti dal testosterone. Abbiamo utilizzato EHNA, un inibitore selettivo della funzione ATPasica della dineina per impedirne il suo movimento lungo i microtubuli e valutato alterazioni dell’aggregazione testosterone dipendente dell’AR. E’ stata quantificata la presenza di aggregati proteici PBS insolubili di AR wild type e poliQ in presenza del blocco del trasporto mediato dalla dineina. I risultati mostrano una netta riduzione degli aggregati proteici citoplasmatici di ARQ.46 indotti dal testosterone, lasciando inalterati i livelli di AR-poliQ in assenza dell’ormone. Invece, EHNA non ha ridotto gli aggregati proteici nucleari di ARQ.112 indotti da testosterone, ma esclusivamente la quota basale di proteina aggregata in assenza dell’ormone. Questi dati indicano che il meccanismo di trasporto mediato dalla dineina svolge un ruolo chiave nella formazione degli aggregati di AR-poliQ indotti dal testosterone e accumulati nella SBMA, è quindi un possibile target terapeutico della patologia.