Phr1p: un nuovo componente del setto in Candida albicans

PHR1 appartiene a una famiglia di 5 geni di C. albicans (PHR1-3, PGA4 and PGA5). L’espressione di PHR1 dipende dal pH ambientale e si attiva a valori di pH > 5.5. Phr1p è dotata di attività di β(1,3)-glucanosil-transferasica (Famiglia GH72) simile a quella delle proteine Gas di S. cerevisiae e delle proteine Gel di A. fumigatus. A pH restrittivo, la perdita di PHR1 induce gravi difetti morfologici, un aumento compensativo di chitina, incapacità di condurre crescita ifale, di aderire e invadere gli epiteli umani ricostituiti. I mutanti nulli PHR1 sono avirulenti in modelli di topo di infezione sistemica. Tramite l’uso di una proteina ibrida Phr1p-GFP, abbiamo localizzato la proteina a livello della gemma, dell’apice delle ife e nel setto sia di divisione che dei setti presenti nelle ife. Quando Phr1p si localizza nel setto crea delle linee molto brillanti ad indicare che la proteina si concentra in grandi quantità lungo la struttura del setto. Questi risultati suggeriscono che Phr1p sia sempre presente laddove avviene sintesi di nuova parete. Abbiamo ulteriormente analizzato il ruolo di Phr1p quale componente del setto. Abbiamo utilizzato il mutante deleto nel gene codificante per Chs3p, l’enzima responsabile della formazione del chitin ring, un anello che circoscrive il setto di divisione (setto primario) e che rimane, una volta terminata la divisione cellulare, sotto forma di cicatrice (bud scar) sulla superficie della cellula madre. A differenza di Gas1p di S. cerevisiae, la proteina Phr1p non si lega covalentemente al chitin ring. Quindi il meccanismo che opera in lievito e trattiene Gas1p nel chitin ring non è presente in C. albicans. Infine, Phr1p-GFP si localizza in stretta vicinanza del setto primario suggerendo che potrebbe essere richiesta per la formazione e il remodeling del setto secondario che si deposita ad ambo i lati del setto primario. Concentrazioni citostatiche di un inibitore altamente specifico per l’enzima chitina sintasi 1 (Chs1p), essenziale per la sintesi del setto primario e per l’integrità della cellula, diventano citocida in assenza di Phr1p. Gli studi hanno evidenziato gravi difetti nella segregazione nucleare e suggeriscono che Phr1p e Chs1p cooperino nel mantenere l’integrità della cellula e nell’acccoppiare la morfogenesi al ciclo di divisione nucleare.