Colture cellulari primarie ottenute da gonadi del comune riccio di mare Paracentrotus lividus

Considerate le enormi potenzialità dell’approccio in vitro nello studio della biologia riproduttiva, sono state condotte ricerche preliminari per l’allestimento di colture cellulari primarie ottenute da gonadi del comune riccio di mare Paracentrotus lividus. Una volta caratterizzati i citotipi, è stata condotta un’accurata indagine del mezzo di coltura più idoneo. I citotipi sono stati caratterizzati con tecniche di microscopia ottica ed elettronica a trasmissione. Successivamente, sono stati testati 3 diversi mezzi di coltura modificati: L-15, M199 e MEM. Il mezzo più idoneo è stato determinato mediante l’osservazione a contrasto di fase delle cellule in coltura e della loro vitalità utilizzando Tripan blue. In vitro sono stati ritrovati gli stessi citotipi già descritti nel modello in vivo: fagociti nutritivi e cellule germinali a diversi stadi di maturazione. Sia l’osservazione a contrasto di fase che la vitalità di queste cellule risultano ottimali utilizzando il mezzo di coltura Leibovitz-15 modificato. I dati finora ottenuti mostrano come sia possibile ottenere colture cellulari da gonadi di riccio di mare e mantenerle vitali fino a quattro settimane. Nonostante ulteriori studi siano sicuramente necessari per un’adeguata ottimizzazione dei metodi, l’approccio da noi proposto si dimostra un ottimo modello sperimentale.