La valutazione della tossicità in vitro con modelli specie-specifici si rivela di notevole importanza nell’ambito della tossicologia veterinaria sia in relazione agli effetti che al metabolismo di xenobiotici. Le cellule della granulosa (GC), cellule steroidogeniche dell’ovaio, rappresentano di fatto una alternativa in vitro per valutare la complessa attività ovarica. Attualmente questo modello in vitro è stato messo a punto con cellule proveniente da diverse specie quali roditori, bovini, suini, primati, proprio per la peculiare specie-specificità, in relazione alla steroidogenesi. Il nostro modello, che presenta analogie con altri riportati in bibliografia (MDG2.1, jc-410), è stato allestito con GC di suino (GCs) prelevate da follicoli di piccole dimensioni (1-5 mm) provenienti da animali dopo la macellazione mantenute in coltura per 48 ore in terreno contenente siero fetale bovino al 5% (FCS) e siero suino al 5% (PS) e per altre 24/48 ore in terreno di coltura senza siero contenente 500 ng/ml di testosterone con o senza trattamenti aggiuntivi. Le GCs possono essere impiegate come modello predittivo di tossicità, attraverso la valutazione di effetti: 1. sulla proliferazione cellulare in presenza di FSH (Follicle Stimulating Hormone) e/o IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor-1) e/o FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9). 2. sulla steroidogenesi in presenza di FSH e/o IGF-1 e/o FGF9 3. sull’espressione genica dell’enzima aromatasi (CYP19A1) e dell’enzima P450 scc (CYP11A1) in presenza di FSH+IGF-1, FSH+IGF-1+FGF9 Dal punto di vista applicativo, l’esposizione di GCs a fusariotossine, contaminanti di origine naturale prodotti da miceti del genere Fusarium, (e.g. Fumonisina B1, Deossinivalenolo, Tossina T-2, Zearalenone), singolarmente e in associazione, ha evidenziato effetti sinergici dose-dipendenti sia relativamente alla proliferazione cellulare che alla steroidogenesi, suggerendo un possibile effetto endocrine disruptor. Bibliografia Ovarian granulosa cell line JC Havelock, WE Rainey, BR Carr mol cell endocrinol 2004, 228: 67-78 Effects of Fusarium mycotoxins on steroid production by porcine granulosa cells G Ranzenigo, Caloni F, Cremonesi F, Aad P Y, Spicer LJ Anim Reprod Sci 2008, 107: 115-130 Microarray Analysis of Insulin-Like Growth Factor-I-induced Changes in mRNA Expression in Cultured Porcine Granulosa Cells: Possible role of IGF-I in Angiogenesis JA Grado-Ahuir, PY Aad, G Ranzenigo, . Caloni, F Cremonesi, LJ Spicer J Anim Sci, 2009,87(6):1921-33 Effects of a trichothecene, T-2 toxin, on proliferation and steroid production by porcine granulosa cells F Caloni G Ranzenigo, FCremonesiLJ Spicer Toxicon, 2009 Sep 1;54(3):337-44 In vitro effect of Fumonisin B1 on proliferation and steroisogenesis of porcine granulose cells. C Cortinovis,N Schreiber, PY Aad,F. Caloni, LJ Spicer ISTISAN CONGRESSI, 2011 95

Tossicità in vitro con modelli specie-specifici : cellule della granulosa di suino / F. Caloni, L.J. Spicer. ((Intervento presentato al 16. convegno Congresso nazionale della Società italiana di tossicologia tenutosi a Giardini Naxos (ME) nel 2012.

Tossicità in vitro con modelli specie-specifici : cellule della granulosa di suino

F. Caloni
Primo
;
2012

Abstract

La valutazione della tossicità in vitro con modelli specie-specifici si rivela di notevole importanza nell’ambito della tossicologia veterinaria sia in relazione agli effetti che al metabolismo di xenobiotici. Le cellule della granulosa (GC), cellule steroidogeniche dell’ovaio, rappresentano di fatto una alternativa in vitro per valutare la complessa attività ovarica. Attualmente questo modello in vitro è stato messo a punto con cellule proveniente da diverse specie quali roditori, bovini, suini, primati, proprio per la peculiare specie-specificità, in relazione alla steroidogenesi. Il nostro modello, che presenta analogie con altri riportati in bibliografia (MDG2.1, jc-410), è stato allestito con GC di suino (GCs) prelevate da follicoli di piccole dimensioni (1-5 mm) provenienti da animali dopo la macellazione mantenute in coltura per 48 ore in terreno contenente siero fetale bovino al 5% (FCS) e siero suino al 5% (PS) e per altre 24/48 ore in terreno di coltura senza siero contenente 500 ng/ml di testosterone con o senza trattamenti aggiuntivi. Le GCs possono essere impiegate come modello predittivo di tossicità, attraverso la valutazione di effetti: 1. sulla proliferazione cellulare in presenza di FSH (Follicle Stimulating Hormone) e/o IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor-1) e/o FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9). 2. sulla steroidogenesi in presenza di FSH e/o IGF-1 e/o FGF9 3. sull’espressione genica dell’enzima aromatasi (CYP19A1) e dell’enzima P450 scc (CYP11A1) in presenza di FSH+IGF-1, FSH+IGF-1+FGF9 Dal punto di vista applicativo, l’esposizione di GCs a fusariotossine, contaminanti di origine naturale prodotti da miceti del genere Fusarium, (e.g. Fumonisina B1, Deossinivalenolo, Tossina T-2, Zearalenone), singolarmente e in associazione, ha evidenziato effetti sinergici dose-dipendenti sia relativamente alla proliferazione cellulare che alla steroidogenesi, suggerendo un possibile effetto endocrine disruptor. Bibliografia Ovarian granulosa cell line JC Havelock, WE Rainey, BR Carr mol cell endocrinol 2004, 228: 67-78 Effects of Fusarium mycotoxins on steroid production by porcine granulosa cells G Ranzenigo, Caloni F, Cremonesi F, Aad P Y, Spicer LJ Anim Reprod Sci 2008, 107: 115-130 Microarray Analysis of Insulin-Like Growth Factor-I-induced Changes in mRNA Expression in Cultured Porcine Granulosa Cells: Possible role of IGF-I in Angiogenesis JA Grado-Ahuir, PY Aad, G Ranzenigo, . Caloni, F Cremonesi, LJ Spicer J Anim Sci, 2009,87(6):1921-33 Effects of a trichothecene, T-2 toxin, on proliferation and steroid production by porcine granulosa cells F Caloni G Ranzenigo, FCremonesiLJ Spicer Toxicon, 2009 Sep 1;54(3):337-44 In vitro effect of Fumonisin B1 on proliferation and steroisogenesis of porcine granulose cells. C Cortinovis,N Schreiber, PY Aad,F. Caloni, LJ Spicer ISTISAN CONGRESSI, 2011 95
2012
Settore VET/07 - Farmacologia e Tossicologia Veterinaria
Società italiana di tossicologia
SITOX
Tossicità in vitro con modelli specie-specifici : cellule della granulosa di suino / F. Caloni, L.J. Spicer. ((Intervento presentato al 16. convegno Congresso nazionale della Società italiana di tossicologia tenutosi a Giardini Naxos (ME) nel 2012.
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